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關於鹿ELISA試劑盒的操作過程☁│,主要分以下7個步驟

釋出時間•·₪: 2022-04-25  點選次數•·₪: 375次
  鹿ELISA試劑盒採用雙抗體兩步夾心酶聯免疫吸附法(ELISA)₪₪。將標準品·◕╃▩、待測樣本加入到預先包被牛血清白蛋白(BSA)透明酶標包被板中☁│,溫育足夠時間後☁│,洗滌除去未結合的成分☁│,再加入酶標工作液☁│,溫育足夠時間後☁│,洗滌除去未結合的成分₪₪。依次加入底物A·◕╃▩、B☁│,底物(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下轉化為藍色產物☁│,在酸的作用下變成黃色☁│,顏色的深淺與樣品中牛血清白蛋白(BSA)濃度呈正相關☁│,450nm波長下測定OD值☁│,根據標準品和樣品的OD值☁│,計算樣本中牛血清白蛋白(BSA)含量₪₪。
 

 

  鹿ELISA試劑盒的準確性•·₪:
  溫育•·₪:加入試劑的順序應一致☁│,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣₪₪。按照說明書中標明的時間·◕╃▩、加液的量及順序進行溫育操作₪₪。
  顯色•·₪:一定要控制時間☁│,根據試劑盒說明操作即可₪₪。一般來說☁│,顯色時間過短☁│,結果偏低;顯色時間過長☁│,空白增高或者非特異性顯色增加₪₪。反應時間的控制•·₪:加入底物後請定時觀察反應孔的顏色變化☁│,如果顏色較深☁│,請提前加入終止液終止反應₪₪。用離心收集在真空血液收集管中的血液☁│,分離血漿樣品☁│,然後儲存在零下80℃直到使用₪₪。以避免血漿中的干擾物質影響檢測☁│,按照說明書方法檢測₪₪。建議實驗前預測樣品含量☁│,如樣品濃度過高☁│,應對樣品進行稀釋☁│,計算結果時乘以相應的稀釋倍數₪₪。
 
  鹿ELISA試劑盒操作過程主要步驟總結如下•·₪:
  稀釋--加樣--溫育--配液--洗滌--加酶--溫育--洗滌--顯色--終止--測定
  詳細操作步驟如下•·₪:
  1·◕╃▩、從室溫平衡20min後的鋁箔袋中取出所需板條☁│,剩餘板條用自封袋密封放回4℃;
  2·◕╃▩、設定標準品孔和樣本孔☁│,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
  3·◕╃▩、樣本孔先加待測樣本10μL☁│,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加;
  4·◕╃▩、除空白孔外☁│,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL☁│,用封板膜封住反應孔☁│,37℃水浴鍋或恆溫箱溫育60min;
  5·◕╃▩、棄去液體☁│,吸水紙上拍幹☁│,每孔加滿洗滌液☁│,靜置1min☁│,甩去洗滌液☁│,吸水紙上拍幹☁│,如此重複洗板5次;
  6·◕╃▩、每孔加入底物A·◕╃▩、B各50μL☁│,37℃避光孵育15min;
  7·◕╃▩、每孔加入終止液50μL☁│,15min內☁│,在450nm波長處測定各孔的OD值₪₪。
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