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按這個步驟操作駱駝ELISA試劑盒↟↟₪▩▩,簡單易懂·✘!

釋出時間│↟│: 2022-08-27  點選次數│↟│: 33次
  駱駝ELISA試劑盒具有高效☁│▩、快捷☁│▩、易批次操作等優點↟↟₪▩▩,不同的廠家提供不同種類↟↟₪▩▩,不同型別的Elisa試劑盒產品↟↟₪▩▩,為科研使用者帶來極大的方便↟☁☁·₪。該試劑盒能夠針對特定檢測源↟↟₪▩▩,製備特異性抗原抗體↟↟₪▩▩,根據應用需要量身定製檢測試劑盒↟↟₪▩▩,有效控制檢測試劑成本↟☁☁·₪。下面我們來看看它的具體實驗步驟↟☁☁·₪。
 

 

  駱駝ELISA試劑盒的實驗步驟│↟│:
  1.標本的採取和儲存│↟│:可用作ELISA測定的標本十分廣泛↟↟₪▩▩,體液(如血清)☁│▩、分泌物(唾液)和排洩物(如尿液☁│▩、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成分↟☁☁·₪。有些標本可直接進行測定(如血清☁│▩、尿液)↟↟₪▩▩,有些則需經預處理(如糞便和某些分泌物)↟☁☁·₪。大部分ELISA檢測均以血清為標本↟☁☁·₪。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外↟↟₪▩▩,其他成分均同等於血清↟☁☁·₪。製備血漿標本需藉助於抗凝劑↟↟₪▩▩,而血清標本只要待血清自然凝固☁│▩、收縮後即可取得↟☁☁·₪。除特殊情況外↟↟₪▩▩,在醫學檢驗中均以血清作為檢測標本↟☁☁·₪。在ELISA中血漿和血清可同等應用↟☁☁·₪。血清標本可按常規方法採集↟↟₪▩▩,應注意避免溶血↟↟₪▩▩,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質↟↟₪▩▩,以HRP為標記的ELISA測定中↟↟₪▩▩,溶血標本可能會增加非特異性顯色↟☁☁·₪。
  2.試劑的準備│↟│:按試劑盒說明書的要求準備實驗中需用的試劑↟☁☁·₪。ELISA中用的蒸餾水或去離子水↟↟₪▩▩,包括用於洗滌的↟↟₪▩▩,應為新鮮的和高質量的↟☁☁·₪。自配的緩衝液應用pH計測量較正↟☁☁·₪。從冰箱中取出的試驗用試劑應待溫度與室溫平衡後使用↟☁☁·₪。試劑盒中本次試驗不需用的部分應及時放回冰箱儲存↟☁☁·₪。
  3.加樣│↟│:在ELISA中一般有3次加樣步聚↟↟₪▩▩,即加標本↟↟₪▩▩,加酶結合物↟↟₪▩▩,加底物↟☁☁·₪。加樣時應將所加物加在LEISA板孔的底部↟↟₪▩▩,避免加在孔壁上部↟↟₪▩▩,並注意不可濺出↟↟₪▩▩,不可產生氣泡↟☁☁·₪。加標本一般用微量加樣器↟↟₪▩▩,按規定的量加入板孔中↟☁☁·₪。每次加標本應更換吸嘴↟↟₪▩▩,以免發生交叉汙染↟↟₪▩▩,也可用一次性的定量塑膠管加樣↟☁☁·₪。有此測定(如間接法ELISA)需用稀釋的血清↟↟₪▩▩,可在試管中按規定的稀釋度稀釋後再加樣↟☁☁·₪。也可在板孔中加入稀釋液↟↟₪▩▩,再在其中加入血清標本↟↟₪▩▩,然後在微型震盪器上震盪1分鐘以保證混和↟☁☁·₪。加酶結合物應用液和底物應用液時可用定量多道加液器↟↟₪▩▩,使加液過程迅速完成↟☁☁·₪。
  4.保溫│↟│:在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應↟↟₪▩▩,即加標本和加酶結合物後↟☁☁·₪。抗原抗體反應的完成需要有一定的溫度和時間↟↟₪▩▩,這一保溫過程稱為溫育(incubation)↟↟₪▩▩,有人稱之為孵育↟↟₪▩▩,在ELISA中似不恰當↟☁☁·₪。ELISA屬固相免疫測定↟↟₪▩▩,抗原☁│▩、抗體的結合只在固相表面上發生↟☁☁·₪。以抗體包被的夾心法為例↟↟₪▩▩,加入板孔中的標本↟↟₪▩▩,其中的抗原並不是都有均等地和固相抗結合的機會↟↟₪▩▩,只有貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸↟☁☁·₪。這是一個逐步平衡的過程↟↟₪▩▩,因此需經擴散才能達到反應的終點↟☁☁·₪。在其後加入的酶標記抗體與固相抗原的結合也同樣如此↟☁☁·₪。這就是為什麼ELISA反應總是需要一定時間的溫育↟☁☁·₪。
  5.洗滌│↟│:洗滌在ELISA過程中雖不是一個反應步驟↟↟₪▩▩,但卻也決定著實驗的成敗↟☁☁·₪。ELISA是靠洗滌來達到分離遊離地和結合的酶標記物的目的↟☁☁·₪。透過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結合的物質↟↟₪▩▩,以及在反應過程中非特異性的吸附於固相↟☁☁·₪。
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