分享◕•！小鼠白介素ELISA試劑盒的實驗操作步驟

　　小鼠白介素ELISA試劑盒採用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）◕▩。往預先包被小鼠白介素捕獲抗體的包被微孔中╃╃，依次加入標本₪◕、標準品₪◕、HRP標記的檢測抗體╃╃，經過溫育並洗滌◕▩。用底物TMB顯色╃╃，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色╃╃，並在酸的作用下轉化成最終的黃色◕▩。顏色的深淺和樣品中的小鼠呈正相關◕▩。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值）╃╃，計算樣品濃度◕▩。

 

　　它的五大優點╃₪↟│·：

　　1₪◕、適用血清₪◕、血漿₪◕、組織勻漿液₪◕、細胞培養上清液₪◕、尿液等等多種標本型別；

　　2₪◕、吸附效能好╃╃，空白值低◕▩。孔底透明度高的固相載體；

　　3₪◕、穩定的重複性和可靠；

　　4₪◕、高效₪◕、靈敏₪◕、特異的抗體；

　　5₪◕、較大限度的節省實驗經費◕▩。

 

　　小鼠白介素ELISA試劑盒的實驗操作步驟╃₪↟│·：

　　1₪◕、把試劑混勻╃╃，切記實驗時不要加理大量含有泡沫的液體╃╃，避免實驗產生誤差◕▩。

　　2₪◕、跟資料測樣決定板條數◕▩。每個標準品和空白孔建議做復孔◕▩。每個樣品根據自己的數量來定╃╃，能使用復孔的儘量做復孔◕▩。

　　3₪◕、加入稀釋好後的標準品50ul於反應孔 加入待測樣品50ul於反應孔內◕▩。立即加入50ul的生物素標記的抗體◕▩。蓋上膜板╃╃，輕輕振盪混勻╃╃，37℃溫育1小時◕▩。

　　4₪◕、甩去孔內液體╃╃，每孔加滿洗滌液╃╃，振盪30秒╃╃，甩去洗滌液╃╃，用吸水紙拍幹◕▩。重複此操作3次◕▩。如果用洗板機洗滌╃╃，洗滌次數增加一次◕▩。

　　5₪◕、每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP╃╃，輕輕振盪混勻╃╃，37℃溫育30分鐘◕▩。

　　6₪◕、甩去孔內液體╃╃，每孔加滿洗滌液╃╃，振盪30秒╃╃，甩去洗滌液╃╃，用吸水紙拍幹◕▩。重複此操作3次◕▩。如果用洗板機洗滌╃╃，洗滌次數增加一次◕▩。

　　7₪◕、每孔加入底物各50ul╃╃，輕輕振盪混勻╃╃，37℃溫育10分鐘◕▩。一定要避免光照◕▩。

　　8₪◕、取出酶標板╃╃，迅速加入50ul終止液╃╃，加入終止液後應立即測定結果◕▩。

　　9₪◕、在450nm波長處測定各孔的OD值◕▩。