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豬ELISA試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中待測物質水平

釋出時間✘₪╃☁: 2022-05-28  點選次數✘₪╃☁: 192次
  豬ELISA試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中待測物質水平·│✘╃。用純化的待測物質抗體包被微孔板☁╃,製成固相抗體☁╃,往包被單抗的微孔中依次加入待測物質☁╃,再與HRP標記的待測物質抗體結合☁╃,形成抗體-抗原-酶標抗體複合物☁╃,經過徹底洗滌後加底物TMB顯色·│✘╃。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色☁╃,並在酸的作用下轉化成最終的黃色·│✘╃。顏色的深淺和樣品中的待測物質呈正相關·│✘╃。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值)☁╃,透過標準曲線計算樣品中待測物質濃度·│✘╃。
 
  豬ELISA試劑盒的組成✘₪╃☁:
  1▩▩•、結合物及標本的稀釋液·│✘╃。
  2▩▩•、洗滌液☁╃,在板式ELISA中☁╃,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩衝鹽水·│✘╃。
  3▩▩•、酶標記的抗原或抗體(結合物)·│✘╃。
  4▩▩•、酶的底物·│✘╃。
  5▩▩•、陰性對照品和陽性對照品(定性測定中)☁╃,elisa試劑盒參考標準品和控制血清(定量測定中)·│✘╃。
  6▩▩•、已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑)·│✘╃。
 
  標本要求✘₪╃☁:
  1▩▩•、標本採集後儘早進行提取☁╃,提取按相關文獻進行☁╃,提取後應儘快進行實驗·│✘╃。若不能馬上進行試驗☁╃,可將標本放於-20℃儲存☁╃,但應避免反覆凍融·│✘╃。
  2▩▩•、不能檢測含NaN3的樣品☁╃,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性·│✘╃。
 
  豬ELISA試劑盒的注意事項✘₪╃☁:
  1▩▩•、試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘後方可使用☁╃,酶標包被板開封后如未用完☁╃,板條應裝入密封袋中儲存·│✘╃。
  2▩▩•、濃洗滌液可能會有結晶析出☁╃,稀釋時可在水浴中加溫助溶☁╃,洗滌時不影響結果·│✘╃。
  3▩▩•、各步加樣均應使用加樣器☁╃,並經常校對其準確性☁╃,以避免試驗誤差·│✘╃。一次加樣時間最好控制在5分鐘內☁╃,如標本數量多☁╃,推薦使用排槍加樣·│✘╃。
  4▩▩•、請每次測定的同時做標準曲線☁╃,最好做復孔·│✘╃。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大於標準品孔第一孔的OD值)☁╃,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n 倍)後再測定☁╃,計算時請最後乘以總稀釋倍數(×n×5)·│✘╃。
  5▩▩•、封板膜只限一次性使用☁╃,以避免交叉汙染·│✘╃。
  6▩▩•、底物請避光儲存·│✘╃。
  7▩▩•、嚴格按照說明書的操作進行☁╃,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準·│✘╃。
  8▩▩•、所有樣品☁╃,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理·│✘╃。
  9▩▩•、本試劑不同批號組分不得混用·│✘╃。
  10▩▩•、如與英文說明書有異☁╃,以英文說明書為準·│✘╃。
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