馬ELISA試劑盒運用雙抗夾心ELISA法定量測定血清☁₪••、血漿☁₪••、組織勻漿☁₪••、細胞裂解液☁₪••、細胞培養上清液和其他生物液體中(Ig)含量▩✘。下面我們來看看它具體的操作步驟和注意事項▩✘。
1.加樣₪◕☁：標準品設定5個濃度點10個孔▩↟，每個濃度設定平行孔▩↟，加入50微升不同濃度的標準品▩↟，空白孔設定1個孔加入50微升蒸餾水☁₪••、待測樣品孔▩↟，在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl▩↟，然後再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）▩✘。加樣將樣品加於酶標板孔底部▩↟，儘量不觸及孔壁▩↟，輕輕晃動混勻▩✘。
2.溫育₪◕☁：用封板膜封板後置37℃溫育30分鐘▩✘。
3.配液₪◕☁：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋後備用▩✘。
4.洗滌₪◕☁：小心揭掉封板膜▩↟，棄去液體▩↟，甩幹▩↟，每孔加滿洗滌液▩↟，靜置30秒後棄去▩↟，如此重複5次▩↟，拍幹▩✘。
5.加酶₪◕☁：每孔加入酶標試劑50μl▩↟，空白孔除外▩✘。
6.溫育₪◕☁：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋後備用▩✘。
7.洗滌₪◕☁：每孔加入酶標試劑50μl▩↟，空白孔除外▩✘。
8.顯色₪◕☁：每孔先加入顯色劑A50μl▩↟，再加入顯色劑B50μl▩↟，輕輕震盪混勻▩↟，37℃避光顯色15分鐘.
9.終止₪◕☁：每孔加終止液50μl▩↟，終止反應▩✘。
10.測定₪◕☁：以空白空調零▩↟，450nm波長依序測量各孔的吸光度▩✘。 測定應在加終止液後15分鐘以內進行▩✘。
馬ELISA試劑盒注意事項₪◕☁：
1.本試劑不同批號組分不得混用▩✘。
2.封板膜只限一次性使用▩↟，以避免交叉汙染▩✘。
3.所有樣品▩↟，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理▩✘。
4.馬ELISA試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘後方可使用▩↟，酶標包被板開封后如未用完▩↟，板條應裝入密封袋中儲存▩✘。
5.濃洗滌液可能會有結晶析出▩↟，稀釋時可在水浴中加溫助溶▩↟，洗滌時不影響結果▩✘。
6.各步加樣均應使用加樣器▩↟，並經常校對其準確性▩↟，以避免試驗誤差▩✘。一次加樣時間最好控制在5分鐘內▩↟，如標本數量多▩↟，推薦使用排槍加樣▩✘。
7.嚴格按說明書的操作進行▩↟，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準▩✘。
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